功能細胞系開發：基因過表達和功能分析
重組穩定細胞系被廣泛應用于藥物發現、毒性檢測和基礎研究中。通常通過轉染或病毒轉導載體來實現目的基因(Gene of Interest, GOI)長期穩定表達，載體中含有GOI的表達元件和篩選標記（抗生素或熒光蛋白）。
與瞬時表達相比，穩定的細胞系為實驗研究提供了可重復的結果。 查看更多 ?
經過選擇，含有表達元件的載體被整合到基因組中，然后進行富集，從而形成穩定的細胞池。從穩定細胞池中進行克隆篩選，產生單克隆細胞。穩定細胞池和單個克隆常常被用于科學研究中。
金斯瑞的重組穩定細胞系開發包括：組成型和誘導型表達。此外，我們還開發了基于慢病毒的CRISPR/Cas (Lenti -CRISPR/Cas9)技術和平臺，以滿足GOI敲除細胞系日益增長的需求，特別是難轉染的癌細胞。
穩定細胞系的應用包括但不限于藥物篩選、基因表達調控、功能檢測、膜蛋白抗體FACS篩選、抗體免疫、含有熒光標簽蛋白的定位研究或者活體成像，以及體內腫瘤免疫實驗。
功能細胞系服務： 金斯瑞CellPower™優勢
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多種轉染
或感染方式 -
250+
靶細胞經驗 -
豐富蛋白
表達經驗 -
180種
支原體檢測 -
多種
檢測方法
CellPower™功能細胞系服務
| 服務 (Cat. No) | 周期 | 交付物 |
|---|---|---|
| CellPower™ 基因過表達 (SC1394) |
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| CellPower™ 報告細胞系 (SC1394) |
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| CellPower™ 誘導系統（基因過表達） (SC1394) |
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Case 1 報告基因型過表達細胞系穩定性測試
蛋白水平測試
| GS-J2/GOI? 穩定性 | ||
|---|---|---|
| 代數 | Fold | Anti-human GOI 單克隆抗體 |
| G5 | 1509 | |
| G10 | 1538 | |
| G15 | 1519 | |
| G20 | 2191 | |
| G25 | 2071 | |
| G30 | 1445 | |
報告基因測試
| 樣品 | G8 | G13 | G18 | G23 | G28 | G33 |
|---|---|---|---|---|---|---|
| Bottom | 3603 | 3592 | 3603 | 5286 | 5450 | 5661 |
| Top | 36749 | 40867 | 36749 | 50889 | 617 | 70338 |
| LogEC50 | 0.6442 | 0.6174 | 0.6442 | 0.6831 | 0.8477 | 0.6919 |
| HillSlope | 1.186 | 1.18 | 1.186 | 0.9446 | 0.7591 | 0.89 |
| EC50 | 4.407 | 4.144 | 4.407 | 4.82 | 7.042 | 4.919 |
| Span | 33146 | 375 | 33146 | 45603 | 56277 | 64678 |
| SB | 10.2 | 11.38 | 10.2 | 9.63 | 11.33 | 12.43 |
| Assay Protocol: （12/27/2018 BY ZX) Antibody：GOI； conc.1=50μg/ml， Assay Buffer：1640 + 10% FBS; Time：6h； Detection Reagent: Bio-Glo; E/T：2:1； Target：10000 cells/well |
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Case 2 GOI的Tet on誘導型表達
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Q‐PCR 驗證Gene A mRNA 表達 |
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Western blot 驗證Gene A 蛋白表達 |
Case 3 GOI的Tet off 誘導型表達
Q‐PCR 和FACS 驗證Gene A mRNA 表達
Column 1：Colo 205/TetOff
Column 2：Colo 205/TetOff_Gene A 0ng/ml Doxycycline
Column 3：Colo 205/TetOff_Gene A 100ng/ml Doxycycline
Case 4 多次跨膜蛋白細胞系
CellPower™功能細胞系開發的工作流程
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