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選擇合適的蛋白表達系統

蛋白表達被普遍應用于不同的科學研究中。目前有四種主要的表達系統可供研究人員選擇，以找到適合其特定應用的表達系統。分別是原核表達系統、酵母表達系統、桿狀病毒-昆蟲表達系統和哺乳動物表達系統。

目的蛋白的性質影響如何選擇表達該蛋白的表達系統，根據這一標準來選擇合適的蛋白表達系統很重要。這些性質包括序列和結構以及活性、功能、折疊以及翻譯后修飾。翻譯后修飾（包括連接蛋白化學或物理性質的功能基團，包括醋酸鹽、磷酸化、各種脂類或糖基化等）對于蛋白的下游應用可能是必要的。盡管每個表達系統具有影響這些標準的不同能力，但重要的是要考慮到某些蛋白適合在一個系統中表達卻對另一個系統具有毒性。金斯瑞的蛋白質表達評估服務可以通過在細菌、酵母、昆蟲或哺乳動物表達系統中進行表達測試以獲得合適的表達系統。

E.coli是常用的蛋白表達系統并且蛋白表達通常是由一個DNA質粒表達載體誘導的。原核蛋白表達系統以大腸桿菌表達系統為代表，具有遺傳背景清晰、成本低、表達量高的特點。如果目的蛋白的來源是原核生物，E.coli?是多數研究人員的選擇。若蛋白來源于真核生物，該系統無翻譯后修飾能力，選擇其他表達系統會更優。但翻譯后修飾對于目的蛋白不重要的情況下，E.coli?仍然是真核生物蛋白表達的良好選擇。

酵母是經濟且快速的真核蛋白表達系統。 金斯瑞的YeastHIGH 技術用于高產量的蛋白生產，降低成本和周期。為確保項目的成功，我們的項目經理將會對每個項目進行評估。

桿狀病毒-昆蟲表達系統可表達不能用大腸桿菌或酵母表達的高質量的糖基化蛋白。昆蟲細胞是一個比酵母更高級的真核系統，因此能夠進行更復雜的翻譯后修飾。

哺乳動物細胞與細菌相比，具有更復雜的蛋白生產能力，包括協助蛋白折疊成正確構象的機制，比如伴侶蛋白和修飾（糖基化、甲基化、磷酸化等）。

對于哺乳動物來源的蛋白，其活性不僅與一級結構（序列）有關，而且與構象和修飾有關，而其他表達系統，尤其是親緣關系遠的系統，無法實現哺乳動物細胞中天然存在的所有修飾。金斯瑞使用經過基因修飾的CHO和HEK293細胞，結合特定的表達載體，生產出高表達量、高質量的蛋白，已被數百個成功的項目所證明。

蛋白表達和性質分析的一站式服務

金斯瑞在分子生物學和蛋白化學領域的專業知識，可在任何步驟提供定制的生物試劑，從而使您的蛋白表達實驗更加成功：

如果你正在設計一個DNA載體，應用如下：

• 體內或體外過表達天然蛋白；
• 表達突變、截短或融合蛋白；
• 表達用于轉錄調控的報道基因，例如受內源啟動子控制的熒光素酶；
• 在誘導型啟動子的控制下表達蛋白。

金斯瑞通過基因合成和亞克隆制備你所需的載體?；蚝铣煞毡苊饬四趯嶒炇抑羞M行酶切、連接和突變、篩選、序列驗證等一系列的麻煩。更重要的是，從頭合成讓您對DNA序列有完全的靈活性和控制力，您可以利用OptimumGene密碼子優化技術，通過引入同義突變來優化mRNA的穩定性和高效翻譯，同時保留氨基酸序列來提高異源蛋白的表達。

如果您打算在實驗室中通過轉染、轉化、電轉、病毒載體等方法將您的DNA載體傳送到培養的細胞或模型生物體中，金斯瑞可以幫助您從質粒、桿狀病毒、慢病毒載體中選擇合適的載體，或者我們可以將您的序列克隆到任何商業上可獲得的或定制的載體上。我們可以幫助您提高基因傳遞效，選擇合適的轉染試劑，并用熒光標記監測蛋白的表達。當我們合成一個蛋白編碼的載體，我們就可以通過我們的蛋白表達評估服務來預測您的蛋白表達情況。

如果您需要純化的蛋白，我們可以提供原核、酵母、昆蟲或哺乳動物蛋白表達和純化服務—保證定制化蛋白的產量和純度。我們的蛋白質科學家使用密碼子優化和基因合成服務，提高了蛋白表達的成功率和快速的交付周期——99%的定制化原核蛋白表達項目表達成功并按時交付。

最后，如果您需要定制化的抗體來檢測目的蛋白，金斯瑞提供一系列的定制化服務。PolyExpress™定制化多克隆抗體服務，用Western blot方法檢測天然蛋白成功率高達95%并且MonoExpress™定制化單克隆抗體服務，包含WB保證型服務。

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